操作步驟(僅供參考):
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 pbs、hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 trypsin-edta solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的 完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 trypsin-edta solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
產(chǎn)品名稱:免疫染色強力通透液供應(yīng)商
規(guī)格:500ml
儲存條件:—20℃,12個月
用途:又稱培養(yǎng)細胞消化液,用于培養(yǎng)細胞的消化,或者一些組織的消化。
注意事項:無菌溶液,經(jīng)過濾除菌處理。主要由胰酶或胰蛋白酶、edta組成,含酚紅。自備材料:
1、 pbs、hanks液或無血清培養(yǎng)液
2、 顯微鏡
3、 離心機
注意事項:
1、 盡量減少反復凍融的次數(shù),以免失效。
2、在使用 trypsin-edta solution 過程中,要特別注意避免消化液被細菌污染。
3、trypsin-edta solution 消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
1. 貼壁細胞的消化:
a.吸去培養(yǎng)液,用無菌的pbs、hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
b.加入少量胰酶細胞消化液(含酚紅,不含edta),略蓋過細胞,室溫放置30秒至2分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。
c.顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液(含酚紅,不含edta)。加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
d.如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細胞消化液(含酚紅,不含edta)重新消化。 如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g離心1分鐘,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液(含酚紅,不含edta)后,加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2. 組織的消化:
a.不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。 附錄:不同胰酶細胞消化液的比較和選擇
1. 如果希望消化能力比較強,推薦選擇c0201胰酶細胞消化液(0.25%胰酶)和c0203 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅),這兩種胰酶細胞消化液都含有edta,消化能力相對更強一些。
2. 如果希望觀察比較方便,推薦選擇含酚紅的c0203 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅)和c0207 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含edta)。
3. 對于酚紅可能會干擾后續(xù)的測試分析,推薦選擇不含酚紅的c0201 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶)和c0205 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,不含edta)。
4. 對于edta可能會干擾后續(xù)的測試分析時,推薦選擇不含edta的c0205 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,不含edta)和c0207 胰酶細胞消化液(0.25%胰酶,含酚紅,不含edta)。
5. 對于胰酶特別敏感的細胞,即對于消化時間特別快、消化時間比較難控制的情況,推薦選擇c0202胰酶細胞消化液(0.05%胰酶)或c0204 胰酶細胞消化液(0.05%胰酶, 含酚紅)。
cfhl5英文名稱:ccdc148人凝血酶原片段f1+2(f1+2)免疫試劑盒
cg028/c7orf28a英文名稱:ccdc153人凝血酶血栓調(diào)節(jié)蛋白復合物(t-tm)免疫試劑盒
cgbp英文名稱:ccdc160人凝血酶受體(tr)免疫試劑盒
cggbp1英文名稱:ccdc22人凝血酶抗凝血酶復合物(tat)免疫試劑盒
cgk2英文名稱:ccdc25人凝血酶(thrombin)免疫試劑盒
cgnl1英文名稱:ccdc28a人凝溶膠蛋白(gelsolin)免疫試劑盒
cgref1英文名稱:ccdc28b人凝聚素(clu)免疫試劑盒
chad英文名稱:ct74人檸檬酸合成酶,線粒體(cs)免疫試劑盒
免疫染色強力通透液供應(yīng)商fbxo27英文名稱:dux4雞抗凝血酶ⅲ(at-ⅲ)抗體免疫試劑盒
fbxo4英文名稱:daz1雞抗鏈球菌溶血素o(aso)抗體(igm)免疫試劑盒
fgfr3英文名稱:phospho-chk2 (ser516)雞抗鏈球菌溶血素o(aso)抗體(igg)免疫試劑盒
fam71d英文名稱:kv2.1雞抗肌內(nèi)膜抗體iga(ema iga)免疫試劑盒
fbxo33英文名稱:drg1雞巨噬細胞替代激活相關(guān)化學因子1(amac-1)免疫試劑盒
fbxl16英文名稱:dal1雞窖蛋白caveolin-1(cav1)免疫試劑盒
fbxl20英文名稱:drak2雞降鈣素(ct)免疫試劑盒
fbxl15英文名稱:dab2雞堿性成纖維細胞生長因子(bfgf)免疫試劑盒
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