液相色譜+蒸發(fā)光散射檢測(cè)器方法檢測(cè)桔梗冬花片中桔梗皂苷D
桔梗冬花片（測(cè)試物質(zhì)：桔梗皂苷d ）
桔梗冬花片
jiegeng donghua pian
【處方】桔梗300g 款冬花37g 制遠(yuǎn)志63g 甘草20g
【制法】以上四味，桔梗150g粉碎成細(xì)粉，剩余桔梗與款冬花、制遠(yuǎn)志、甘草加水煎煮三次，每次2小時(shí)，煎液濾過， 合并濾液，靜置，取上淸液濃縮成稠膏，加入桔梗細(xì)粉，混勻，干燥，研細(xì)，制成顆粒，干燥，或加人硬脂酸鎂適量，壓制成 1000片，包糖衣或薄膜衣，即得，
【性狀】本品為糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后顯棕色 至棕褐色（味微甜。
【蘧別】（1)取本品，置顯撤鏡下觀察：聯(lián)結(jié)乳管直徑14?25μm，含淡黃色顆粒狀物（桔梗）。
(2)取本品5片，除去包衣，研細(xì)，加乙酵30ml,加熱回流 1小時(shí)，放冷，濾過，濾液回收溶劑至干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取桔梗對(duì)照藥材1g,加乙醇20ml,同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl,分別點(diǎn)于同一桂膠h薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯甲酸(5:5 :0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醉溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色淸晰，日光下檢視。 供試品色請(qǐng)中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的主斑點(diǎn)。
（3）取本品20片，除去包衣，研細(xì),加乙醉50ml,冷浸1小 時(shí)后，超聲處理30分鐘，濾過，濾液揮千，殘?jiān)右宜嵋阴?0. 5ml使溶解，作為供試品溶液。另取款冬花對(duì)照藥材0. 5g， 同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法（通則0502>試驗(yàn)，吸 取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠g薄層板上，以石油醚（60?90℃）-丙酮（4 ： 1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色淸晰，日光下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
（4）取本品10片，除去包衣，研細(xì)，加三氯甲烷50ml,加熱回流30分鐘，濾過，濾液回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取遠(yuǎn)志對(duì)照藥材0.5g,加三氣甲 烷20ml,同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法（通則0502) 試驗(yàn)，吸取供試品溶液20μl、對(duì)照藥材溶液5μl，分別點(diǎn)于同一 硅膠g薄層板上，以石油醚（60?90℃)-丙酮（4 :1）為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外光（365mn)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的熒光斑點(diǎn)。
（5）取本品20片，除去包衣，研細(xì)，加甲醇50ml,加熱回流30分鐘，濾過，濾液回收溶劑至干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙釀提取液， 回收溶劑至干，殘?jiān)右宜嵋裔刲ml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對(duì)照藥材0.5g,同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，吸取供試品溶液15μl、對(duì)照藥材溶液5μl,分別點(diǎn)于同一硅膠g薄層板上，以三氯甲烷-異丙酵 (10 :1)為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外光（365nm)下檢 視,供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同 顏色的熒光主斑點(diǎn)，再噴以8%香草醛乙醇溶液和硫酸溶液 (7→10)的混合溶液（0.5 :5),在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色淸晰，在日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。
【檢査】應(yīng)符合片劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。
【正丁醇浸出物】取本品30片，除去包衣，梢密稱定，研細(xì)，取適量（約10片的重量），精密稱定，置具塞錐形瓶中，精 密加入甲醇100ml,稱定重量，加熱回流提取1小時(shí)，放冷，再稱定重童，用甲醇補(bǔ)足減失的重置，濾過，精密量取續(xù)濾液50ml,回收溶劑至干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用乙mi振搖提 取3次，每次30ml，棄去乙mi液，再用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次30ml，合并正丁醇提取液，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，蒸干，在105c干燥3小時(shí),移置干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計(jì)算，即得。
本品每片含正丁醇浸出物不得少于8. 0mg。
【含置獼定】桔根 照高效液相色譜法測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-水（26:70）為流動(dòng)相；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)(漂移管溫度：65度，氣體流速3l/min，氣體壓力：3.8bar)。理論板數(shù)按桔梗皂苷d峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。
elsd9000 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器
對(duì)照品溶液的制備 取枯梗皂苷d對(duì)照品適精密稱 定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得，
供試品溶液的制備 取本品20片，除去包衣，稱密稱定，研細(xì)，取約2g,精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50ml,稱定重量，超聲處理（功率250w,頻率40kh*)30分鐘，放冷，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重釐，搖勻，濾過，精密量取續(xù)滹液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml,合并正丁醇提取液，用氨試液50ml洗滌，棄去氨液，正丁醇液回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)浦液，即得。
測(cè)定法 精密吸取對(duì)照品溶液5μl、10μl供試品溶液各 10?15μl,注入液相色譜儀，測(cè)定，用外標(biāo)兩點(diǎn)法對(duì)數(shù)方程計(jì)算，即得.
本品每片含桔梗以枯梗皂苷d(c57h92o28)計(jì)，不得少于0. 22mg。
甘草 照高效液相色譜法測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑>以甲辭-水-冰醱酸-三乙胺（65:35 : 1:0.3)為流動(dòng)相 ，檢測(cè)波長(zhǎng)為250nms理論板數(shù)按甘草酸峰計(jì)算應(yīng)不低于 2500。
對(duì)照品溶液的制備 取甘蘋酸銨對(duì)照品適量，精密稱定， 加50%甲諄制成每1ml含40μg的溶液，即得（甘蘋酸的重量=甘蘋酸銨的重量/i. 0207〉。
供試品溶液的制備 取本品10片，除去包衣，梢密稱定，研細(xì)，取約0.5g,精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50% 甲醇25ml,稱定重量，超聲處理（功率250w，頻率40khz) 30分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醉補(bǔ)足減失的重最，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測(cè)定法 精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl,注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本品每片含甘草以甘草酸（c42 h62 011 )計(jì)，不得少于 0. 30mg,
【功能與主治】止咳祛痰。用于痰濁阻肺所致的咳嗽痰多；支氣管炎見上述證候者。
【用法與用量】口服，一次6?8片，一日3次。
【規(guī)格】薄膜衣片每片重0.25g。
【貯藏】密封。
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測(cè)違禁詞勿動(dòng)
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【性狀】本品為糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后顯棕色 至棕褐色（味微甜。
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(2)取本品5片，除去包衣，研細(xì)，加乙酵30ml,加熱回流 1小時(shí)，放冷，濾過，濾液回收溶劑至干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取桔梗對(duì)照藥材1g,加乙醇20ml,同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl,分別點(diǎn)于同一桂膠h薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯甲酸(5:5 :0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醉溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色淸晰，日光下檢視。 供試品色請(qǐng)中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的主斑點(diǎn)。
（3）取本品20片，除去包衣，研細(xì),加乙醉50ml,冷浸1小 時(shí)后，超聲處理30分鐘，濾過，濾液揮千，殘?jiān)右宜嵋阴?0. 5ml使溶解，作為供試品溶液。另取款冬花對(duì)照藥材0. 5g， 同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法（通則0502>試驗(yàn)，吸 取上述兩種溶液各10μl，分別點(diǎn)于同一硅膠g薄層板上，以石油醚（60?90℃）-丙酮（4 ： 1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色淸晰，日光下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
（4）取本品10片，除去包衣，研細(xì)，加三氯甲烷50ml,加熱回流30分鐘，濾過，濾液回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取遠(yuǎn)志對(duì)照藥材0.5g,加三氣甲 烷20ml,同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄層色譜法（通則0502) 試驗(yàn)，吸取供試品溶液20μl、對(duì)照藥材溶液5μl，分別點(diǎn)于同一 硅膠g薄層板上，以石油醚（60?90℃)-丙酮（4 :1）為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外光（365mn)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顔色的熒光斑點(diǎn)。
（5）取本品20片，除去包衣，研細(xì)，加甲醇50ml,加熱回流30分鐘，濾過，濾液回收溶劑至干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙釀提取液， 回收溶劑至干，殘?jiān)右宜嵋裔刲ml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對(duì)照藥材0.5g,同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗(yàn)，吸取供試品溶液15μl、對(duì)照藥材溶液5μl,分別點(diǎn)于同一硅膠g薄層板上，以三氯甲烷-異丙酵 (10 :1)為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外光（365nm)下檢 視,供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同 顏色的熒光主斑點(diǎn)，再噴以8%香草醛乙醇溶液和硫酸溶液 (7→10)的混合溶液（0.5 :5),在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色淸晰，在日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的主斑點(diǎn)。
【檢査】應(yīng)符合片劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。
【正丁醇浸出物】取本品30片，除去包衣，梢密稱定，研細(xì)，取適量（約10片的重量），精密稱定，置具塞錐形瓶中，精 密加入甲醇100ml,稱定重量，加熱回流提取1小時(shí)，放冷，再稱定重童，用甲醇補(bǔ)足減失的重置，濾過，精密量取續(xù)濾液50ml,回收溶劑至干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用乙mi振搖提 取3次，每次30ml，棄去乙mi液，再用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次30ml，合并正丁醇提取液，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，蒸干，在105c干燥3小時(shí),移置干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計(jì)算，即得。
本品每片含正丁醇浸出物不得少于8. 0mg。
【含置獼定】桔根 照高效液相色譜法測(cè)定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-水（26:70）為流動(dòng)相；蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)(漂移管溫度：65度，氣體流速3l/min，氣體壓力：3.8bar)。理論板數(shù)按桔梗皂苷d峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。
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對(duì)照品溶液的制備 取枯梗皂苷d對(duì)照品適精密稱 定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得，
供試品溶液的制備 取本品20片，除去包衣，稱密稱定，研細(xì)，取約2g,精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50ml,稱定重量，超聲處理（功率250w,頻率40kh*)30分鐘，放冷，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重釐，搖勻，濾過，精密量取續(xù)滹液25ml，回收溶劑至干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml,合并正丁醇提取液，用氨試液50ml洗滌，棄去氨液，正丁醇液回收溶劑至干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)浦液，即得。
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對(duì)照品溶液的制備 取甘蘋酸銨對(duì)照品適量，精密稱定， 加50%甲諄制成每1ml含40μg的溶液，即得（甘蘋酸的重量=甘蘋酸銨的重量/i. 0207〉。
供試品溶液的制備 取本品10片，除去包衣，梢密稱定，研細(xì)，取約0.5g,精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50% 甲醇25ml,稱定重量，超聲處理（功率250w，頻率40khz) 30分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醉補(bǔ)足減失的重最，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
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