alzet迷你滲透膠囊 model2002 使用手冊
概述: alzet滲透泵是一種小型、可植入式的膠囊,可應用于小鼠、大鼠及其他實驗動物研究。該膠囊無需進行外部連接或頻繁處理,就能以恒定的速率持續(xù)給藥一天到四周的時間。
lot no. 10212-08
平均泵出速率 0.51 ul/hr
標準差 0.02 ul/hr
平均灌注體積 244.6 ul
標準差 6.0 ul
alzet滲透泵現(xiàn)貨表
貨號 品名 規(guī)格 品牌
2001d 透壓泵200ul緩釋1天 10支/盒 alzet
alzet1003d 0000289 微滲泵 100ul 3天 10ps/box alzet
alzet1002 0004317 微滲泵 100ul 2周 10支/盒 alzet
alzet2004 0000298 微滲泵 200ul 4周 10支/盒 alzet
alzet2006 0007223 微滲泵 200ul 6周 10支/盒 alzet
alzet1004 0009922 微滲泵 100ul 4周 10支/盒 alzet
alzet1007d 0000290 微滲泵 100ul 1周 10支/盒 alzet
alzetkit1 0004760 微滲泵 brain infusion kit 10 個/盒 alzet
alzet2001 0000292 微滲泵 200ul 1周 10支/盒 alzet
alzet2002 0000296 微滲泵 200ul 2周 10支/盒 alzet
alzet2ml1 0000323 微滲泵 2ml 1周 10支/盒 alzet
alzet2ml2 0000325 微滲泵 2ml 2周 10支/盒 alzet
alzet2ml4 0000327 微滲泵 2ml 4周 10支/盒 alzet
一、alzet迷你滲透膠囊 model2002基本描述
a.性能(37℃)
泵送率0.5 μl/hr (± 0.1 μl/hr)
持續(xù)時間 14天
膠囊容量 200ul
b.組件
1.灌注管(filling tube)
2.流量調(diào)節(jié)器(flow moderator)
3.膠囊(pump body materials)
二、alzet迷你滲透膠囊 model2002使用注意點
1. alzet迷你滲透膠囊不可重復使用
2.膠囊必須被溶液充滿,同時需要記錄灌注量
3.溶解藥物的溶劑需與膠囊材料相兼容
4.在實驗過程中,藥物在溶劑中要保持穩(wěn)定
5.藥物的質(zhì)量輸出速率用方程式ko = q • cd 計算,ko為藥物質(zhì)量輸出速率?g/hr),q是膠囊中溶液的體積輸出速率(?l/hr),cd為藥物濃度(?g/?l)
6.在對膠囊進行灌注,操作以及手術(shù)植入過程中要確保無菌
7.如果要想膠囊立刻起作用,或者膠囊中灌注的是粘性溶液,或者如果附加一根導管,那么膠囊需在無菌的37℃生理鹽水中至少孵育4-6小時
8.如果膠囊使用的環(huán)境與正常的哺乳動物的體溫以及滲透壓顯著不同時,膠囊的泵送率可能會受到影響。
9. 膠囊在給藥完成后或植入21天內(nèi)需取出,如超時,膠囊附近組織內(nèi)的水分會進入膠囊,導致局部組織隆起,并處于高鹽狀態(tài),對機體組織產(chǎn)生傷害。
10.通過與導管連接,alzet迷你滲透膠囊可向動靜脈循環(huán),大腦,器官,內(nèi)腔等持續(xù)提供藥物。
11.在實驗過程中通過監(jiān)測血藥濃度可以驗證膠囊實驗的正確性,同時通過查看試驗完成后膠囊中藥物的剩余量,以及進行體外實驗等也可驗證。
三、alzet迷你滲透膠囊灌注方法步驟
藥物充滿膠囊很重要,正確的灌注方法下面已經(jīng)給出。膠囊中有氣泡或者不能正確將流量調(diào)節(jié)器插入膠囊將會導致不可預測的藥物泵送率波動。 在灌注和植入過程中應戴手套;另外大量的油脂如果在皮膚表面聚積,可能會影響膠囊性能;如果膠囊被污染了,應用70%的異丙醇擦拭,切忌不能用異丙醇浸泡;注意要在常溫下灌注藥物。
step1:稱量空膠囊以及它的流量調(diào)節(jié)器(總重)
step2:利用27式灌裝管以及1ml的注射器灌裝膠囊。若使用較大注射器,由于灌裝速度過快,可能會在膠囊中產(chǎn)生氣泡。用注射器抽取藥物溶液,裝上灌裝管。需要注意的是注射器和與其連接的灌裝管之間不能有氣泡。
step3:拔掉流量調(diào)節(jié)器,將膠囊直立,從膠囊頂部的小開口插入灌流管,直到不能再插入為止。此時灌流管的接近膠囊的底部。
step4:保持膠囊直立,緩慢推注射器的活塞。當藥物溶液到達膠囊頂部小開口處停止灌注,小心移去灌注管(速度快了可能會產(chǎn)生氣泡)。
step5:擦掉溢出的藥物溶液,插入流量調(diào)節(jié)器直到白色帽子到達膠囊頂部為止。插入的流量調(diào)節(jié)器將會取代部分已經(jīng)灌注到膠囊中的藥物溶液,溢出的溶液需要擦干凈。確保該裝置正常運行,需要將流量調(diào)節(jié)器全部插進膠囊中。
step6:稱量灌滿后的膠囊(連同流量調(diào)節(jié)器),步驟6和步驟1的差值為灌注的藥物溶液的凈重。對于大多數(shù)稀釋的水溶液,重量(mg)=體積(ul)。灌注的體積應該大于平均灌注體積(mean fill volume)的90%,即244.6*0.9=220.41。如果是這樣的話,灌裝后的膠囊就可以使用了,如果不滿足以上條件,說明膠囊中含有氣泡,不能使用。
如果在灌注過程中阻力較大,可在灌注過程中將灌注管小角度翹起,灌注的小孔可通過來回移動灌注管而擴大,或者在插入灌注管之前多次插入及拔出流量調(diào)節(jié)器以達到擴大灌注孔的目的。
四、藥物溶液如何配制及與膠囊的兼容性
膠囊與水,稀釋的酸,堿溶液以及與稀釋的或低濃度的dmso,酒精兼容,也與100%丙烯和聚乙二醇兼容。alzet膠囊與脂肪族,芳香烴類化合物不兼容,例如庚烷,甲苯,動植物油脂。使用不兼容的溶劑可能導致膠囊喪失功能。下表提供了一些與膠囊兼容的常用
的已知溶劑。
ph大于1.8的酸 1-甲基-2-吡咯烷酮,在水中達12.5%
ph小于14的堿 聚乙二醇 300或400,溶于水或純
聚氧乙烯蓖麻油,在水中濃度達到25% 丙二醇,純或溶于水
培養(yǎng)基(1%的苯甲醇用于抑制細菌生長) 林格式溶液(包含或不包含乳酸鹽)
葡萄糖,在水中或nacl中達5% 0.9%生理鹽水
二甲基甲酰胺,在水中濃度達到25% 血清(大鼠,小鼠)
dmso,在水中或聚乙二醇中濃度達50% solutol,在水中達30%
dmso,在水中或乙醇(<=15%)中達50% 甘油醋酸酯,在水中達5%
乙醇,在水中濃度達到15% tween 80,濃度達2%
甘油 蒸餾水
注意,以上溶劑只是與膠囊材料相兼容,實際操作過程中,還要注意是否與組織或體液兼容。 溶液在膠囊中產(chǎn)生氣泡可能會影響藥物的泵送率,溶液中如果含有一些沉淀的不溶顆粒時需要過濾后使用,alzet泵能夠泵出均質(zhì)的粘性溶液(粘度小于100000厘泊),懸浮液如果不沉淀也能被泵出。為了確保泵出速率的一致性,在持續(xù)泵出過程中懸浮液需保持均質(zhì)。
五、alzet滲透膠囊體內(nèi)植入手術(shù)alzet滲透膠囊可被植入動物皮下,動物重至少20g。首先在肩胛骨間的皮膚處切一小口,然后用止血鉗將皮膚和皮下結(jié)締組織分開,形成一個小的袋。將膠囊插入,流量調(diào)節(jié)器朝里,皮膚開口可縫合或者用夾子夾住。
lzet滲透膠囊可被植入動物腹部,動物重至少150g。首先在動物胸腔下面皮膚開一個中線小口,然后在皮膚下的腹部肌肉處開一個小口,將膠囊流量調(diào)節(jié)器朝內(nèi)插入腹部。肌肉開口用線縫合,皮膚開口可用線縫合也可用夾子夾住。
六、alzet滲透膠囊的檢測
alzet是精密的給藥工具,泵送率和灌注體積已經(jīng)給出,膠囊在4-6小時的啟動時間后,給藥速率趨于恒定,直到剩余5%的藥物時,泵送率迅速下降,直到0為止。
durect方法是在37℃(+-0.5℃)下,0.9%的生理鹽水中離體測量泵送率,這種方法具有較好的可重復性。
a.離體質(zhì)量檢測
選取20個相同型號膠囊作為隨機樣本,膠囊中充滿染液。充滿后,膠囊浸沒在0.9%的生理鹽水(37℃)中,每隔一定時間將膠囊轉(zhuǎn)移到含有新鮮生理鹽水的試管中,直到第14天,對膠囊中泵出染料進行標準分析。在4-336h過程中,每個膠囊都以恒定速率泵出染料。通過durect實驗,每個膠囊的時間依賴泵送率變量系數(shù)小于10%,均值的標準誤為5%。
b.啟動時間
如果膠囊在室溫下灌注,浸沒到等滲的生理鹽水(37℃),泵送率在幾小時內(nèi)不會達到穩(wěn)定。如果實驗要求立即給藥,durect建議將未灌注藥物的膠囊浸沒在0.9%的生理鹽水中4-6小時(37℃),如果與導管相連或者灌注粘性藥物時,以上步驟必須進行。
c.藥物持續(xù)泵送的驗證
藥物持續(xù)泵送可通過方程d = (v/q) (.95)驗證,
d是持續(xù)時間,v是規(guī)格書中給出 的膠囊泵送容量體積(ul),q是泵送率(ul/hr)。 七、驗證alzet滲透膠囊的準確性 為了驗證實驗結(jié)果是否來自持續(xù)給藥,durect建議alzet膠囊使用者在實驗過程中的幾個時間點檢測血液藥物水平。注意不能將zui后膠囊中剩余空間作為泵出的藥物量,因為在實驗過程中,膠囊會吸收水分,同樣,切開一個用完的膠囊來驗證其性能也是不可靠的。
確定平均泵送率alzet迷你滲透膠囊的容量體積稍微大于14天泵出的溶液量。zui后,會有一些藥物溶液殘留在膠囊內(nèi),可用灌注管和1ml的注射器吸走。用額外的溶劑沖洗膠囊,對剩余藥物溶液進行分析,算出殘余藥物量。平均泵送率=(起始藥物量-殘余藥物量)/運行時間。
確定離體實驗泵送率alzet迷你滲透膠囊給出的體積泵送率是在等滲的生理鹽水(37℃)中測定的,用戶發(fā)現(xiàn)檢測泵送率是必需的。durect給出了以下步驟:
step1:準備一種能溶于生理鹽水的已知濃度溶液作為指示劑。泵出的指示劑的量作為計算泵送率的基礎(chǔ)。指示劑必需與膠囊相兼容,同時還容易在等滲的生理鹽水中進行分析。 step2:根據(jù)第三部分的方法將指示劑溶液灌注到膠囊中。
step3:將膠囊放進一只裝有15ml等滲生理鹽水的20ml試管中,在37℃中進行預孵育,用塞子塞住試管,以防蒸發(fā)。
step4:記錄孵育的開始時間。
step5:大約每隔24小時,將膠囊轉(zhuǎn)移到一只新的裝有15ml等滲的生理鹽水中去,記錄轉(zhuǎn)移的時間或者兩次轉(zhuǎn)移間隔的時間。
step6:重復步驟5約14天。
step7:分析每只試管內(nèi)的指示劑的濃度,以確定每個時間段內(nèi)泵出的指示劑的量。指示劑的量處以時間間隔(小時),即為泵送率。
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