FRO細(xì)胞|人甲狀腺癌細(xì)胞FRO 處理方法
fro細(xì)胞|人甲狀腺癌細(xì)胞fro 處理方法
素冉生物依托同濟(jì)大學(xué)，上海市東方醫(yī)院，上海市第一婦嬰保健院供應(yīng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，人脂肪干細(xì)胞，無血清細(xì)胞凍存液，ips功能性細(xì)胞，huvec細(xì)胞，各類細(xì)胞株細(xì)胞系，所有人源細(xì)胞均str鑒定后入庫。并供應(yīng)各類血清，培養(yǎng)基，胰酶，雙抗，完全培養(yǎng)基等。
產(chǎn)品名稱：fro細(xì)胞
中文名稱：人甲狀腺癌細(xì)胞fro
規(guī)格：t25瓶
形態(tài)特征：上皮樣
生長狀態(tài)：貼壁生長
是否str鑒定：人甲狀腺未分化癌細(xì)胞（anaplastic thyroid carcinoma, atc），未分化，每支細(xì)胞量1×106 。每個批次均通過本庫支原體檢測，結(jié)果為陰性。 該細(xì)胞株經(jīng)過str鑒定，與國際上atcc、dsmz、jcrb和riken 公布的str數(shù)據(jù)庫中8000余種細(xì)胞均不相符，排除被常見細(xì)胞系污染的可能。由于fro細(xì)胞本身沒有公布可比對的str圖譜數(shù)據(jù)，我們只能初步判斷該細(xì)胞可能為fro。
培養(yǎng)條件：1640 +10%fbs（推薦hakata優(yōu)等胎牛血清 貨號：hn-fbs-500）
傳代方法：1:3傳代；2~3天1次。
凍存條件：hakata ® 無血清細(xì)胞凍存液 貨號：h-w-100 規(guī)格：100ml
支原體檢測：陰性
使用權(quán)限：a類
參考文獻(xiàn)：str結(jié)果如下：d5s818: 11,12；d13s317: 12；d7s820: 8；d16s539: 9,13；vwa: 16,18；tho1: 6,7；amelogenin: x；tpox: 8,11；csf1po: 11
復(fù)蘇周期：10個工作日左右
培養(yǎng)步驟：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1ml細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5ml培養(yǎng)基混合均勻。在1000rpm條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6ml完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的pbs潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%trypsin-0.53mm edta）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000rpm條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
ps：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至t25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
2、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000rpm條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000rpm條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及dmso，凍存比例為90%fbs+10%dmso。
ps：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至t25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
處理方法：
1. 收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置若干小時（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100×，200×各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行售后的依據(jù)。
2. 收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)重發(fā)一次細(xì)胞。
3. 由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩氐挠绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后是需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后與客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4. 如客戶對細(xì)胞的種類、純度、活性等特性有疑問，需提供相應(yīng)的生物學(xué)實(shí)驗檢測結(jié)果作為依據(jù)。
備注：各位老師收到后用無菌離心管收集瓶中培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng)
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上海素冉生物科技有限公司
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產(chǎn)品名稱：fro細(xì)胞
中文名稱：人甲狀腺癌細(xì)胞fro
規(guī)格：t25瓶
形態(tài)特征：上皮樣
生長狀態(tài)：貼壁生長
是否str鑒定：人甲狀腺未分化癌細(xì)胞（anaplastic thyroid carcinoma, atc），未分化，每支細(xì)胞量1×106 。每個批次均通過本庫支原體檢測，結(jié)果為陰性。 該細(xì)胞株經(jīng)過str鑒定，與國際上atcc、dsmz、jcrb和riken 公布的str數(shù)據(jù)庫中8000余種細(xì)胞均不相符，排除被常見細(xì)胞系污染的可能。由于fro細(xì)胞本身沒有公布可比對的str圖譜數(shù)據(jù)，我們只能初步判斷該細(xì)胞可能為fro。
培養(yǎng)條件：1640 +10%fbs（推薦hakata優(yōu)等胎牛血清 貨號：hn-fbs-500）
傳代方法：1:3傳代；2~3天1次。
凍存條件：hakata ® 無血清細(xì)胞凍存液 貨號：h-w-100 規(guī)格：100ml
支原體檢測：陰性
使用權(quán)限：a類
參考文獻(xiàn)：str結(jié)果如下：d5s818: 11,12；d13s317: 12；d7s820: 8；d16s539: 9,13；vwa: 16,18；tho1: 6,7；amelogenin: x；tpox: 8,11；csf1po: 11
復(fù)蘇周期：10個工作日左右
培養(yǎng)步驟：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1ml細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5ml培養(yǎng)基混合均勻。在1000rpm條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6ml完全培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的pbs潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%trypsin-0.53mm edta）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，完全脫落后吸出，在1000rpm條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
ps：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至t25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
2、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000rpm條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，進(jìn)行離心收集，1000rpm條件下離心8-10分鐘，去除上清，按凍存數(shù)量加入血清及dmso，凍存比例為90%fbs+10%dmso。
ps：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至t25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完全培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
處理方法：
1. 收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置若干小時（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100×，200×各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行售后的依據(jù)。
2. 收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)重發(fā)一次細(xì)胞。
3. 由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩氐挠绊?，故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后是需出示收到細(xì)胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后與客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。
4. 如客戶對細(xì)胞的種類、純度、活性等特性有疑問，需提供相應(yīng)的生物學(xué)實(shí)驗檢測結(jié)果作為依據(jù)。
備注：各位老師收到后用無菌離心管收集瓶中培養(yǎng)基，留作過渡培養(yǎng)
人t細(xì)胞白血病細(xì)胞;6t-cem 人t細(xì)胞白血病細(xì)胞;6t-cem t25
人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;cem/c1 人急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;cem/c1 t25
tc-1 小鼠肺上皮細(xì)胞 t25
dt40 dt40（雞淋巴瘤細(xì)胞) t25
dc2.4 dc2.4 t25
ht22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞系 ht22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞系 t25
hbmec人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 hbmec人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 t25
小鼠肝癌22(h22) 小鼠肝癌22(h22) t25
id8 id8小鼠卵巢癌細(xì)胞 t25
kyse-14 人食管鱗癌細(xì)胞；kyse-140 t25
hs578bst 人正常乳腺細(xì)胞 t25
tu 686 人喉癌細(xì)胞 tu 686 t25
ketr-3 人腎癌細(xì)胞 t25
snu-216 snu-216;人胃癌細(xì)胞 t25
u373 人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 t25
u343 人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 t25
tpc-1 人甲狀腺乳頭狀細(xì)胞tpc-1 t25
mdbk mdbk；牛腎細(xì)胞 t25
nci-h157 人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 t25
tu212 人喉癌細(xì)胞,tu212細(xì)胞 t25
sv-huc-1 人膀胱上皮永生化細(xì)胞 t25
snb-19 人膠質(zhì)瘤細(xì)胞 t25
bcpap 人甲狀腺癌乳頭狀細(xì)胞 t25
k1 人甲狀腺癌細(xì)胞 t25
kcl-22 人慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞 t25
c918 人眼脈絡(luò)黑色瘤細(xì)胞胞
hct116/l 人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑耐藥株 t25
5-8f 鼻咽癌細(xì)胞株 t25
rs1 大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞；rs1 t25
人肝癌細(xì)胞；li-7 人肝癌細(xì)胞；li-7 t25
人胚肺成纖維細(xì)胞；imr-90 人胚肺成纖維細(xì)胞；imr-90 t25
鼠小腦細(xì)胞英文名：c8-d1a 鼠小腦細(xì)胞英文名：c8-d1a t25
c2c12 小鼠胚胎肌母 小鼠胚胎肌母細(xì)胞 t25
uwb1.289 (atcc® crl-2945™) uwb1.289 (atcc® crl-2945™) t25
uwb1.289+brca1 (atcc® crl-2946™) uwb1.289+brca1 (atcc® crl-2946™) t25
小鼠胰腺癌細(xì)胞（b類）；pan02 小鼠胰腺癌細(xì)胞（b類）；pan02 t25
hs 68 男性正常gui頭細(xì)胞系 hs68 t25
helf人胚肺成纖維細(xì)胞 helf人胚肺成纖維細(xì)胞 t25
hs888lu hs888lu t25
hs 1.tes hs 1.tes人正常睪丸細(xì)胞 t25
pc-3m pc-3m人前列腺癌細(xì)胞 t25
te354.t te354.t人皮膚基底細(xì)胞癌 t25
sw839? sw839?人腎癌細(xì)胞 t25
kmb-17 人二倍體細(xì)胞系kmb-17 t25
ht-3 ht-3人子宮頸癌細(xì)胞 t25
6-10b 鼻咽癌細(xì)胞株 t25
dcs 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞；dcs t25
mfc 小鼠前胃癌細(xì)胞 t25
walker/llc-wrc 256 大鼠腹水癌細(xì)胞 t25
lewis/luc 小鼠肺癌細(xì)胞-熒光 t25
rm-1 小鼠前列腺癌細(xì)胞 t25
ma104 羅猴胎腎細(xì)胞 t25
tta1 人甲狀腺癌細(xì)胞 t25
act-1 人甲狀腺癌細(xì)胞 t25
cal-62 人甲狀腺癌細(xì)胞 t25
bht101 人甲狀腺癌細(xì)胞 t25
hth-7 人甲狀腺癌細(xì)胞 t25
hth83 人甲狀腺癌細(xì)胞 t25
khm-5m 人甲狀腺癌細(xì)胞 t25
kmh-2 人甲狀腺癌細(xì)胞 t25
ktc-1 人甲狀腺癌細(xì)胞 t25
ocut-2c 人甲狀腺癌細(xì)胞 t25
c643 人甲狀腺癌細(xì)胞 t25
nthy-ori 3-1 人甲狀腺正常細(xì)胞 t25
sw 982 [sw-982, sw982] 人滑膜肉瘤細(xì)胞 t25
h22/luc 小鼠肝癌細(xì)胞h22標(biāo)記luciferase t25
hdf-a 人皮膚成纖維 t25
hff-1 人皮膚成纖維 t25
zr-75-30 zr-75-30 人乳腺癌細(xì)胞 t25
e0771 e0771 小鼠乳腺癌細(xì)胞 t25
hce-t hce-t人角膜上皮細(xì)胞 t25
gl261 gl261小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞 t25
c666-1 c666-1; 人鼻咽癌細(xì)胞 t25
rle-6tn rle-6tn;大鼠肺泡ⅱ型細(xì)胞 t25
rsc96 大鼠雪旺細(xì)胞;rsc96 t25
hl-1 小鼠心肌細(xì)胞 t25
panc02 小鼠胰腺癌細(xì)胞 t25
mle-12 小鼠肺泡上皮細(xì)胞 mle-12 t25
s-180 s-180小鼠腹水瘤細(xì)胞 t25
sp2/0 sp2/0小鼠骨髓瘤細(xì)胞 t25
k7m2 wt [k7m2-wt] k7m2 wt [k7m2-wt]小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞 t25
acc-2 人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞；acc-2 t25
ccc-esf-1 人胚皮膚成纖維細(xì)胞；ccc-esf-1 t25
umr-106 umr-106大鼠骨肉瘤細(xì)胞 t25
hcmec/d3 hcmec/d3(永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞) t25
hmc3 人小膠質(zhì)細(xì)胞;hmc3 t25
zr-75-30 zr-75-30 人乳腺癌細(xì)胞 t25
llc/luc 小鼠肺癌細(xì)胞帶熒光素酶 t25
4t1/luc 小鼠乳腺癌細(xì)胞帶熒光素酶 t25
mda-mb-231/luc 人乳腺癌細(xì)胞帶熒光素酶 t25
a549/gfp 人肺癌細(xì)胞帶綠色熒光 t25
ct26.wt/luc 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞帶熒光素酶 t25
143b/luc 人骨肉瘤細(xì)胞帶熒光素酶 t25
smmc7721/gfp 人肝癌細(xì)胞帶綠色熒光 t25
p815 小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞；p815 t25
hkc 人腎小管上皮細(xì)胞；hkc t25
huvec 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞;huvec t25
aro 人甲狀腺癌細(xì)胞aro t25
fro 人甲狀腺癌細(xì)胞fro t25
kgn 人卵巢顆粒細(xì)胞 kgn t25
sum159pt sum159pt 人乳腺癌細(xì)胞 t25
mmq 大鼠垂體瘤細(xì)胞；mmq t25
iose-80 人正常卵巢上皮細(xì)胞 iose-80 t25
ovca-429 人卵巢癌細(xì)胞ovca-429 t25
kns-89 kns-89人腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞 t25
上海素冉生物科技有限公司
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