歐美克ns-90納米粒度分析儀在一臺(tái)儀器中集成了動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)和靜態(tài)光散射兩種技術(shù)。
【動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)】:ns-90使用動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)測(cè)量粒子和分子大小。
液體中的粒子由于周圍的溶劑分子撞擊產(chǎn)生隨機(jī)布朗運(yùn)動(dòng)。小粒子在液體中運(yùn)動(dòng)速度較快,而大顆粒運(yùn)動(dòng)相對(duì)緩慢。這種運(yùn)動(dòng)一直都在進(jìn)行,所以如果我們?nèi)∫恍《螘r(shí)間間隔拍攝樣品運(yùn)動(dòng)“圖像”,我們可以看出粒子移動(dòng)了多少,并且換算出它有多大。相同時(shí)間內(nèi),如果位移比較小,粒子位置接近,則樣品中粒子較大;相反地,如果位移較大,粒子位置變化很大,則樣品中粒子較小。這種利用擴(kuò)散速度與粒徑之間的關(guān)系測(cè)定粒子的大小的方法即為動(dòng)態(tài)光散射(dls)技術(shù),也稱為光子相關(guān)光譜(pcs)技術(shù)。
ns-90使用90°動(dòng)態(tài)光散射技術(shù),利用光電檢測(cè)器測(cè)量樣品中粒子發(fā)生布朗運(yùn)動(dòng)所產(chǎn)生的散射光強(qiáng)波動(dòng)信號(hào),再通過(guò)數(shù)字相關(guān)器得到相關(guān)函數(shù)(correlation function),最后使用斯托克斯-愛因斯坦(stokes-einstein)方程計(jì)算出粒子的粒徑與分布。通過(guò)本技術(shù)所測(cè)量的粒徑,是和被測(cè)量粒子以相同速度擴(kuò)散的硬球直徑。
【靜態(tài)光散射技術(shù)】:ns-90使用靜態(tài)光散射(sls)技術(shù)測(cè)量蛋白質(zhì)與聚合物的分子量。靜態(tài)光散射是一種非侵入技術(shù),用于表征溶液中的分子。
與動(dòng)態(tài)光散射工作方式類似,當(dāng)激光照射樣品中的粒子時(shí),粒子在各個(gè)方向上發(fā)生散射。但與動(dòng)態(tài)光散射技術(shù)不同,靜態(tài)光散射技術(shù)是測(cè)量一段時(shí)間內(nèi)散射光的時(shí)間平均強(qiáng)度。因這個(gè)時(shí)間平均光強(qiáng)不能反應(yīng)信號(hào)隨時(shí)間的動(dòng)態(tài)變化,故稱為“靜態(tài)光散射”。
因粒子產(chǎn)生的散射光強(qiáng)度正比于重均分子量的平方以及粒子濃度,使用靜態(tài)光散射法可以確定蛋白質(zhì)與聚合物的分子量。在此測(cè)量方法中,檢測(cè)一系列不同濃度下樣品的散射光強(qiáng)(kc/r),將該數(shù)值與標(biāo)準(zhǔn)物(如甲苯)產(chǎn)生的散射光強(qiáng)進(jìn)行比較,即可得到德拜圖(debye plot)。德拜圖中的擬合直線斜率為第二維里系數(shù)(2nd virial coefficient, a2),擬合直線外延到零濃度的數(shù)值為平均分子量的倒數(shù)(1/mw)。分子量單位為 da(dalton) 或g/mol。
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