caski復(fù)蘇培養(yǎng)細(xì)胞株優(yōu)惠大
ca ski復(fù)蘇培養(yǎng)細(xì)胞株優(yōu)惠大 "
細(xì)胞接收操作說明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說明及相應(yīng)的細(xì)胞說明書。
本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：t25培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來說，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于4℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。
t25培養(yǎng)瓶：是用t25細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開包裝t25培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴75%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)（有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片）。將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將t25中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于80%，可以直接消化傳代，相反則加入5-6ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。
離心管：是用15ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將t25中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒有t25培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)t75 培養(yǎng)瓶，加入10-15ml培養(yǎng)基,，建議10ml培養(yǎng)基，也可以使用t175 培養(yǎng)瓶，加入50-60ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，最好不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心（1000rpm，3min）收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。
接收細(xì)胞相關(guān)問題：如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞，t25及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在37度過夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置1-2天（注意不要放冰箱），干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-80度冰箱，若干冰完全升華，請(qǐng)即刻復(fù)蘇細(xì)胞。
t25瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。t25瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心（1200rpm，5min）后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。
部分細(xì)胞在運(yùn)輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用pbs洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心（1000rpm，3min）收集細(xì)胞，并用pbs重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。" "
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：
1.所有的東西使用最好的，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞。
2.動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因。
3.有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措。
4.要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，細(xì)胞房的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)。
5.個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟。
6.細(xì)胞房不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。
每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?
1.嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干。
2.不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套。
3.有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)。
4.水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)。
5.晚上離開的時(shí)候最好給細(xì)胞房照紫外，超凈臺(tái)是用完就開。
6.最好的是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用細(xì)胞房在養(yǎng)細(xì)胞。
養(yǎng)了幾年細(xì)胞，說一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法：
1.培養(yǎng)細(xì)胞前，可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說明書，包括細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。
2.不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同，有的生長(zhǎng)很快，比如說mda-mb-231，傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，bt474就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿，所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了。
3.對(duì)于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)了，胰酶消化不能過久，吹得時(shí)候要輕柔，離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間，每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況。
4.凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天最好更換一次培養(yǎng)基。
5.培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次。
6.養(yǎng)細(xì)胞最大的教訓(xùn)：不能偷懶!
細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。
1.不管買的細(xì)胞、惠贈(zèng)的細(xì)胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測(cè)是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存。
2.發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢，買個(gè)支原體檢測(cè)的kit定期檢測(cè)一下。
3.細(xì)胞房日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸。
4.細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔，不要隨心所欲或者拖延。
5.注意個(gè)人衛(wèi)生。" "
從最基礎(chǔ)的地方教起，一步一步詳細(xì)介紹細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，非常好的開門教程
常用設(shè)備
準(zhǔn)備室的設(shè)備：?jiǎn)握麴s水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、
高壓鍋、儲(chǔ)品柜（放置未消毒物品）、儲(chǔ)品柜（放置消毒過的物品）、包裝臺(tái)。
配液室的設(shè)備：扭力天平和電子天平（稱量藥品）、ph計(jì)（測(cè)量培養(yǎng)用液ph值）、磁力攪拌器（配置溶液室攪拌溶液）。
培養(yǎng)室的設(shè)備：液氮罐、儲(chǔ)品柜（存放雜物）、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱（-80℃）、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(tái)（書寫實(shí)驗(yàn)記錄）。
必須放在無菌間的設(shè)備：離心機(jī)（收集細(xì)胞）、超凈工作臺(tái)、倒置顯微鏡、co2孵箱（孵育培養(yǎng)物）、水浴鍋、三氧消毒殺菌機(jī)、4℃冰箱（放置serum和培養(yǎng)用液）。
無菌操作
無菌室的滅菌：
定期打掃無菌室：每周打掃一次，先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺(tái)等，然后用3‰來蘇爾或者新潔爾滅擦拭。
co2孵箱（培養(yǎng)箱）滅菌：先用3‰新潔爾滅擦拭，然后用75％酒精擦拭，再用紫外燈照射
實(shí)驗(yàn)前滅菌：打開紫外燈、三氧殺菌機(jī)、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘
實(shí)驗(yàn)后滅菌：用75％酒精（3‰新潔爾滅）擦拭超凈臺(tái)、邊臺(tái)、倒置顯微鏡的載物臺(tái)。
實(shí)驗(yàn)人員的無菌準(zhǔn)備：
肥皂洗手。
穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋
用75％酒精棉球擦凈雙手。" "
公司提供部分atcc細(xì)胞有(限于頁面篇幅，公司全部細(xì)胞并未展示，如有具體所需細(xì)胞，請(qǐng)咨詢我們哦┈技┈術(shù)(訂┈購)┈熱┈線┈：┈０┈２┈１┈５┈４┈３┈８┈７┈６┈５┈６┈(┈１┈８┈３┈０┈１┈９┈０┈８┈２┈７┈９┈微┈信┈同┈號(hào)┈)┈聯(lián)┈系┈q┈q：┈１┈２┈９┈２┈７┈５┈２┈１┈５┈７┈)；crl-2577|rko細(xì)胞；crl-2579|rko-as45-1細(xì)胞；crl-2578|rko-e6細(xì)胞；cl-187|ls 180細(xì)胞；ccl-225|hct-15細(xì)胞；ccl-221|dld-1細(xì)胞；crl-1469|panc-1細(xì)胞；crl-1918|cfpac-1細(xì)胞；crl-1435|pc-3細(xì)胞；crl-1682|aspc-1細(xì)胞；crl-1687|bxpc-3細(xì)胞；crl-1492|ar42j細(xì)胞；crl-1420|miapaca-2細(xì)胞；crl-2172|sw1990細(xì)胞；htb-80|capan-ⅱ/capan-2細(xì)胞；crl-2119|hpac細(xì)胞；htb-52|sk-hep-1細(xì)胞；hb-8064|hep-3b細(xì)胞；crl-2235|snu-182細(xì)胞；crl-5803|nci-h1299細(xì)胞；crl-11233|thle-3細(xì)胞；ccl-249|ncl-h548細(xì)胞；htb-171|nci-h446細(xì)胞；htb-180|nci-h345細(xì)胞；crl-2064|dms153細(xì)胞；ccl-257|nci-h1688細(xì)胞；htb-177|nci-h460細(xì)胞；htb-183|nci-h661細(xì)胞；htb-182|nci-h520細(xì)胞；crl-5883|nci-h1650細(xì)胞；crl-5908|nci-h1975細(xì)胞；crl-5844|nci-h838細(xì)胞；crl-5934|nci-h2227細(xì)胞；crl-1848|nci-h292細(xì)胞；htb-178|nci-h596細(xì)胞；crl-5800|nci-h23細(xì)胞；crl-5922|nci-h2087細(xì)胞；ccl-185|a549細(xì)胞；htb-53|a-427細(xì)胞；" "
北京朝陽|海淀|通州|房山|豐臺(tái)|昌平|大興|順義|西城|延慶縣|石景山|宣武|懷柔|崇文|密云縣|東城|平谷|門頭溝|廣東東莞|廣州|中山|深圳|惠州|江門|珠海|汕頭|佛山|湛江|河源|肇慶|清遠(yuǎn)|潮州|韶關(guān)|揭陽|陽江|梅州|云浮|茂名|汕尾|山東濟(jì)南|青島|臨沂|濟(jì)寧|菏澤|煙臺(tái)|淄博|泰安|濰坊|日照|威海|濱州|東營(yíng)|聊城|德州|萊蕪|棗莊|江蘇蘇州|徐州|鹽城|無錫|南京|南通|連云港|常州|鎮(zhèn)江|揚(yáng)州|淮安|泰州|宿遷|河南鄭州|南陽|新鄉(xiāng)|安陽|洛陽|信陽|平頂山|周口|商丘|開封|焦作|駐馬店|濮陽|三門峽|漯河|許昌|鶴壁|濟(jì)源|上海松江|寶山|金山|嘉定|南匯|青浦|浦東新區(qū)|奉賢|徐匯|靜安|閔行|黃浦|楊浦|虹口|普陀|閘北|長(zhǎng)寧|崇明縣|盧灣|河北石家莊|唐山|保定|邯鄲|邢臺(tái)|河北|滄州|秦皇島|張家口|衡水|廊坊|承德|浙江溫州|寧波|杭州|臺(tái)州|嘉興|金華|湖州|紹興|舟山|麗水|衢州|陜西西安|咸陽|寶雞|漢中|渭南|安康|榆林|商洛|延安|銅川|湖南長(zhǎng)沙|邵陽|常德|衡陽|株洲|湘潭|永州|岳陽|懷化|郴州|婁底|益陽|張家界|湘西州|重慶江北|渝北|沙坪壩|九龍坡|萬州|永川|南岸|酉陽縣|北碚|涪陵|秀山縣|巴南|渝中|石柱縣|忠縣|合川|大渡口|開縣|長(zhǎng)壽|榮昌縣|云陽縣|梁平縣|潼南縣|江津|彭水縣|綦江縣|璧山縣|黔江|大足縣|巫山縣|巫溪縣|墊江縣|豐都縣|武隆縣|萬盛|銅梁縣|南川|奉節(jié)縣|雙橋|城口縣|福建漳州|廈門|泉州|福州|莆田|寧德|三明|南平|龍巖|天津和平|北辰|河北|河西|西青|津南|東麗|武清|寶坻|紅橋|大港|漢沽|靜?？h|塘沽|寧河縣|薊縣|南開|河?xùn)||云南昆明|紅河|大理|文山|德宏|曲靖|昭通|楚雄|保山|玉溪|麗江|臨滄|思茅|西雙版納|怒江|迪慶|四川成都|綿陽|廣元|達(dá)州|南充|德陽|廣安|阿壩|巴中|遂寧|內(nèi)江|涼山|攀枝花|樂山|自貢|瀘州|雅安|宜賓|資陽|眉山|甘孜|廣西貴港|玉林|北海|南寧|柳州|桂林|梧州|欽州|來賓|河池|百色|賀州|崇左|防城港|安徽蕪湖|合肥|六安|宿州|阜陽|安慶|馬鞍山|蚌埠|淮北|淮南|宣城|黃山|銅陵|亳州|池州|巢湖|滁州|湖北武漢|宜昌|襄樊|荊州|恩施州|黃岡|孝感|十堰|咸寧|黃石|仙桃|天門|隨州|荊門|潛江|鄂州|神農(nóng)架林|山西太原|大同|運(yùn)城|長(zhǎng)治|晉城|忻州|臨汾|呂梁|晉中|陽泉|朔州|遼寧大連|沈陽|丹東|遼陽|葫蘆島|錦州|朝陽|營(yíng)口|鞍山|撫順|阜新|盤錦|本溪|鐵嶺|黑龍江齊齊哈爾|哈爾濱|大慶|佳木斯|雙鴨山|牡丹江|雞西|黑河|綏化|鶴崗|伊春|大興安嶺|七臺(tái)河|內(nèi)蒙古赤峰|包頭|通遼|呼和浩特|鄂爾多斯|烏海|呼倫貝爾|興安盟|巴彥淖爾盟|烏蘭察布盟|錫林郭勒盟|阿拉善盟|貴州貴陽|黔東南|黔南|遵義|黔西南|畢節(jié)|銅仁|安順|六盤水|甘肅蘭州|天水|慶陽|武威|酒泉|張掖|隴南|白銀|定西|平?jīng)鰘嘉峪關(guān)|臨夏回族自治州|金昌|甘南|吉林吉林|長(zhǎng)春|白山|延邊州|白城|松原|遼源|通化|四平|寧夏銀川|吳忠|中衛(wèi)|石嘴山|固原" "
公司已合作單位有貴陽醫(yī)學(xué)院、重慶師范大學(xué)、福建醫(yī)科大學(xué)、山東中醫(yī)藥大學(xué)、長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)、河南中醫(yī)學(xué)院、昆明醫(yī)科大學(xué)、寧夏醫(yī)科大學(xué)、湖北中醫(yī)藥大學(xué)、廣西中醫(yī)藥大學(xué)、內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)、徐州醫(yī)學(xué)院、福建中醫(yī)藥大學(xué)、瀘州醫(yī)學(xué)院、廣東醫(yī)學(xué)院、江西中醫(yī)藥大學(xué)、廣東藥學(xué)院、新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院、遼寧醫(yī)學(xué)院、遵義醫(yī)學(xué)院、濰坊醫(yī)學(xué)院、泰山醫(yī)學(xué)院、濱州醫(yī)學(xué)院、皖南醫(yī)學(xué)院、甘肅中醫(yī)學(xué)院、蚌埠醫(yī)學(xué)院、陜西中醫(yī)學(xué)院、濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院、貴陽中醫(yī)學(xué)院、桂林醫(yī)學(xué)院、承德醫(yī)學(xué)院、牡丹江醫(yī)學(xué)院、贛南醫(yī)學(xué)院、長(zhǎng)治醫(yī)學(xué)院、齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院、西安醫(yī)學(xué)院、河北中醫(yī)學(xué)院、成都醫(yī)學(xué)院、吉林醫(yī)藥學(xué)院、首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院、首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院、浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院、首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京兒童醫(yī)院、廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院、中山大學(xué)孫逸仙紀(jì)念醫(yī)院、南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院、天津醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院、中山大學(xué)中山眼科中心、天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院、中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院、蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬上海兒童醫(yī)學(xué)中心、武漢大學(xué)人民醫(yī)院、北京醫(yī)院、吉林大學(xué)第一醫(yī)院、山東省立醫(yī)院、第四軍醫(yī)大學(xué)唐都醫(yī)院、首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京朝陽醫(yī)院、上海市胸科醫(yī)院、中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液學(xué)研究所、重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院、北京大學(xué)腫瘤醫(yī)院、浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬兒童醫(yī)院、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一人民醫(yī)院、西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院、第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院、上海市精神衛(wèi)生中心、中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院整形外科醫(yī)院、北京積水潭醫(yī)院、山東省腫瘤醫(yī)院、沈陽軍區(qū)總醫(yī)院、北京大學(xué)第六醫(yī)院、中日友好醫(yī)院、哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院、東方肝膽外科醫(yī)院、上海市兒童醫(yī)院、中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院、重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院" "
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